PEGilación del citocromo c a nivel de residuos de lisina mediada por una transglutaminasa microbiana
Jian Qin Zhou 1, Ting He 1, Jian Wen Wang 2
Resumen
Objetivos: Establecer un método para la PEGilación mediada por transglutaminasa microbiana (mTG) de proteínas a nivel de residuos de lisina (Lys).
Resultados: Se preparó carboxibencil-glutaminil-glicinil-metoxipolietilenglicol (CBZ-QG-mPEG) introduciendo carboxibencil-glutaminil-glicina (CBZ-QG) en una amina de mPEG. El análisis mediante espectroscopía infrarroja por transformada de Fourier y SDS-PAGE mostró que CBZ-QG-mPEG se sintetizó con éxito y mTG puede reconocerlo como un donante de acilo para modificar la proteína terapéutica, el citocromo c (cyt c). Finalmente, en condiciones optimizadas (cyt c 0,5 mg/ml, CBZ-QG-mPEG 11,25 mg/ml, mTG 0,5 mg/ml, 37 °C, 2 h), el rendimiento de PEGilación alcanzó el 76,5 %.
Conclusiones: Este es el primer estudio sobre la PEGilación de proteínas a nivel de residuos de Lys catalizada por mTG. El nuevo método podría emplearse para inmovilizar proteínas activas y modificar proteínas terapéuticas.
Palabras clave: Residuo de lisina; Transglutaminasa microbiana; PEGilación; Proteína terapéutica; Transglutaminasa.
Abreviatura: mPEG-NH2
Nombre: Metoxipoli(etilenglicol) amina
Abreviatura: mPEG-SPA
Nombre: Metoxipoli(etilenglicol)succinimidil propionato
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