J Pharm Sci. Febrero de 2020;109(2):981-991. doi: 10.1016/j.xphs.2019.10.052. Publicación electrónica, 2 de noviembre de 2019.
Conjugación de poliésteres funcionalizados con amina con dimetilcaseína mediante transglutaminasa microbiana
Abstracto
Los conjugados proteína-polímero se han utilizado como agentes terapéuticos debido a que exhiben frecuentemente mayor estabilidad, vida media in vivo prolongada y menor inmunogenicidad en comparación con las proteínas nativas. La primera parte de este informe describe la síntesis enzimática de poli(adipato de glicerol) (PGA(M)) por transesterificación entre glicerol y adipato de dimetilo usando lipasa B de Candida antarctica. PGA(M) es un poliéster hidrofílico, biodegradable pero insoluble en agua. Por acilación, PGA(M) se modifica con ácido 6-(Fmoc-amino)hexanoico y con cadenas laterales hidrofílicas de poli(etilenglicol) (mPEG12) haciendo que el polímero sea altamente soluble en agua. A esto le sigue la eliminación de grupos protectores, fluorenilmetiloxicarbonilo, para generar poliéster con grupos amina primarios, a saber, PGA(M)-g-NH2-g-mPEG12. Se han utilizado espectroscopia de RMN de 1H, espectroscopia FTIR y cromatografía de permeación en gel para determinar la estructura química y el índice de polidispersidad de PGA(M) antes y después de la modificación. En la segunda parte, se analiza la conjugación, mediada por transglutaminasa microbiana, de la proteína modelo dimetilcaseína con PGA(M)-g-NH₂-g-mPEG₁ en condiciones de reacción suaves. La SDS-PAGE demuestra la conjugación proteína-poliéster.
Palabras clave:
CAL-B; poliéster funcionalizado con amina; polimerización enzimática; transglutaminasa microbiana (mTGasa); poli(adipato de glicerol) (M); conjugado proteína-polímero.
