Revisión Mol Pharm. 2 de diciembre de 2024;21(12):5944-5959. doi: 10.1021/acs.molpharmaceut.4c00826. Publicación electrónica: 11 de noviembre de 2024. Desarrollo de sistemas de administración de ARNm-LNP térmicamente estables: progreso actual y perspectivas futuras Abstracto El éxito de las vacunas contra la COVID-19 basadas en ARNm-LNP abre una nueva era para la terapia basada en ARNm-LNP. Se espera que este avance impulse el desarrollo de más medicamentos basados en ARNm-LNP, no solo para vacunas preventivas, sino también con fines terapéuticos. A pesar de las prometedoras perspectivas, existen desafíos fundamentales que impiden el progreso y la aplicación generalizada de las formulaciones de ARNm-LNP. Uno de los desafíos más importantes es su inestabilidad térmica, que requiere que estos productos se almacenen a temperaturas ultrabajas para garantizar su estabilidad a largo plazo. Los requisitos específicos presentan desafíos significativos para el almacenamiento, el transporte y la distribución de las formulaciones de ARNm-LNP. Para prepararse eficazmente ante futuros brotes de enfermedades infecciosas y ampliar la aplicación de las terapias basadas en ARNm-LNP para otras enfermedades, es fundamental mejorar la termoestabilidad de las formulaciones de ARNm-LNP. En esta revisión, analizamos los factores potenciales que contribuyen a la inestabilidad térmica de las formulaciones de ARNm-LNP y examinamos los roles de componentes clave como lípidos ionizables, colesterol, pH, tampones y agentes estabilizadores como azúcares para mantener su estabilidad térmica, con el objetivo de brindar información que pueda guiar el desarrollo futuro de formulaciones de ARNm-LNP térmicamente estables. Palabras clave: Formulaciones; Estabilidad funcional; Nanopartículas lipídicas; Estabilidad fisicoquímica; Estabilidad térmica; ARNm. Para obtener más información sobre el producto, contáctenos en: EE. UU. Tel: 1-844-782-5734 EE. UU. Tel: 1-844-QUAL-PEG Teléfono de CHN: 400-918-9898 Correo electrónico: sales@sinopeg.com

J Virol. 13 de junio de 2024;98(6):e0057824. doi: 10.1128/jvi.00578-24. Publicación electrónica 2024 20 de mayo. Una vacuna contra el virus de Lassa basada en ARNm-LNP induce inmunidad protectora en ratones Abstracto El virus Lassa del mammarenavirus (LASV) causa la fiebre hemorrágica potencialmente mortal, la fiebre de Lassa. La falta de contramedidas médicas autorizadas contra el LASV subraya la urgente necesidad de desarrollar nuevas vacunas LASV, que se ha visto obstaculizada por el requisito de una instalación de nivel de bioseguridad 4 para manipular LASV vivo. Aquí, investigamos la eficacia de las vacunas basadas en nanopartículas lipídicas de ARNm (ARNm-LNP) que expresan el precursor de la glucoproteína LASV (LASgpc) o la nucleoproteína (LCMnp) del mammarenavirus prototípico, el virus de la coriomeningitis linfocítica (LCMV), en ratones. Dos dosis de LASgpc o LCMnp-ARNm-LNP administradas por vía intravenosa (iv) protegieron a ratones C57BL/6 de un desafío letal con un LCMV recombinante (r) que expresa un LASgpc modificado (rLCMV/LASgpc2m) inoculado intracranealmente. La inmunización intramuscular (im) con dos dosis de LASgpc- o LCMnp-ARNm-LNP redujo significativamente la carga viral en ratones C57BL/6 inoculados iv con rLCMV/LASgpc2m. Se observaron altos niveles de viremia y letalidad en ratones CBA inoculados iv con rLCMV/LASgpc2m, que fueron anulados por la inmunización im con dos dosis de LASgpc-ARNm-LNP. La eficacia protectora de dos dosis im de LCMnp-ARNm-LNP se confirmó en un modelo de enfermedad hemorrágica letal de ratones FVB inoculados iv con rLCMV de tipo silvestre. En todas las condiciones probadas, se detectaron niveles insignificantes y altos de anticuerpos específicos contra LASgpc y LCMnp en ratones inmunizados con ARNm-LNP, respectivamente, pero se indujeron respuestas robustas de células T CD8+ específicas contra LASgpc y LCMnp. En consecuencia, el plasma de ratones inmunizados con LASgpc-ARNm-LNP no mostró actividad neutralizante. Nuestros hallazgos y los modelos murinos sustitutos de infección por LASV, que pueden estudiarse a un nivel de biocontención reducido, proporcionan una base fundamental para el rápido desarrollo de vacunas contra LASV basadas en ARNm-LNP. IMPORTANCIA: El virus de Lassa (LASV) es un mammarenavirus altamente patógeno responsable de cientos de miles de infecciones anuales en países de África Occidental, causando un alto número de casos letales de fiebre de Lassa (LF). A pesar de su significativo impacto en la salud humana, no existen contramedidas médicas clínicamente aprobadas, seguras y eficaces contra la LF. El requisito de una instalación de nivel de bioseguridad 4 para manipular LASV vivo ha sido uno de los principales obstáculos para la investigación y el desarrollo de contramedidas contra LASV. En este trabajo, informamos que dos dosis de vacunas basadas en nanopartículas lipídicas de ARNm que expresan el precursor de la glicoproteína LASV (LASgpc) o la nucleoproteína (LCMnp) del virus de ...

Biomedicinas. 16 de junio de 2023;11(6):1735. doi: 10.3390/biomedicines11061735. El ARNm-LNP de ASL, un tratamiento terapéutico para la aciduria argininosuccínica, permite un beneficio de supervivencia en un modelo murino. Abstracto La aciduria argininosuccínica (ASA) es un trastorno metabólico causado por una deficiencia de la argininosuccinato liasa (ASL), que escinde el ácido argininosuccínico en arginina y fumarato en el ciclo de la urea. La deficiencia de ASL (ASLD) provoca disfunción hepatocitaria, hiperamonemia, encefalopatía y alcalosis respiratoria. En este estudio, describimos un nuevo enfoque terapéutico para el tratamiento de la ASA, basado en ARN mensajero modificado con nucleósidos (ARNm) formulado en nanopartículas lipídicas (LNP). Para optimizar el ARNm que codifica para ASL, modificamos su capuchón, las regiones no traducidas 5' y 3', la secuencia codificante y la cola de poli(A). Probamos múltiples optimizaciones del ARNm formulado en células humanas y ratones C57BL/6 de tipo silvestre. La proteína ASL mostró una expresión robusta in vitro e in vivo y un perfil de seguridad favorable, con baja secreción de citocinas y quimiocinas, incluso tras la administración de dosis crecientes de ARNm-LNP de ASL. En el modelo murino ASLNeo/Neo de ASLD, la administración intravenosa del principal candidato terapéutico, LNP-ASL CDS2, mejoró drásticamente la supervivencia de los ratones. Al administrarse dos veces por semana, dosis más bajas protegieron parcialmente a los ratones, mientras que 3 mg/kg de LNP-ASL CDS2 los protegieron por completo. Estos resultados demuestran el considerable potencial del ARNm codificante de ASL modificado y formulado con LNP como alternativa eficaz a los enfoques basados en AAV para el tratamiento de la ASA. Palabras clave: deficiencia de argininosuccinato liasa (ASLD); aciduria argininosuccínica (ASA); nanopartículas lipídicas-ARNm (LNP-ARNm); optimización de ARNm; terapia de ARNm; enfermedad rara. Para obtener más información sobre el producto, contáctenos en: EE. UU. Tel: 1-844-782-5734 EE. UU. Tel: 1-844-QUAL-PEG Teléfono de CHN: 400-918-9898 Correo electrónico: sales@sinopeg.com

Revisión Eur J Pharm Biopharm. Abr. 2024:197:114222. doi: 10.1016/j.ejpb.2024.114222. Publicación electrónica, 20 de febrero de 2024. Cinética de la administración de ARN-LNP y expresión de proteínas Abstracto Las nanopartículas lipídicas (LNP) que emplean lípidos ionizables constituyen la tecnología más avanzada para la administración de ARN, especialmente ARNm, a las células. Las LNP representan partículas con un núcleo-capa bien definido que ofrecen una encapsulación eficiente de ácidos nucleicos, baja inmunogenicidad y una eficacia mejorada. Si bien se conoce mucho sobre la estructura y la actividad de las LNP, se presta menos atención a la sincronización de su captación, transferencia citosólica y expresión proteica. Sin embargo, la cinética de las LNP es un factor clave que determina la eficiencia de la administración. Por lo tanto, resulta de interés el conocimiento cuantitativo de la vía multicascada de las LNP para dilucidar el mecanismo de administración. En este trabajo, revisamos experimentos y modelos teóricos de la sincronización de la captación de LNP, la liberación de ARNm y la expresión proteica. Describimos la administración de LNP como una secuencia de procesos de transferencia estocásticos y revisamos un modelo matemático de la posterior traducción de proteínas a partir del ARNm. Recopilamos probabilidades y números obtenidos mediante microscopía de resolución temporal. Específicamente, la obtención de imágenes de células vivas en matrices de células individuales (LISCA) permite la adquisición de alto rendimiento de miles de ciclos de expresión de reporteros GFP individuales. Los rastros muestran la distribución de la vida del ARNm, las tasas de expresión y el inicio de la expresión. El análisis de correlación revela una dependencia inversa entre la eficiencia de la expresión génica y el inicio de la transfección. Finalmente, analizamos por qué el momento de la liberación del ARNm es crucial en el contexto de la coadministración de múltiples especies de ácidos nucleicos, como en el caso de la coexpresión del ARNm o la edición génica CRISPR/Cas. Para obtener más información sobre el producto, contáctenos en: EE. UU. Tel: 1-844-782-5734 EE. UU. Tel: 1-844-QUAL-PEG Teléfono de CHN: 400-918-9898 Correo electrónico: sales@sinopeg.com

Revisión Biomedicinas. 10 de mayo de 2021;9(5):530. doi: 10.3390/biomedicines9050530. Aplicación no inmunoterapéutica del ARNm de LNP: maximización de la eficacia y la seguridad Abstracto Las vacunas basadas en ARN mensajero (LNP-ARNm) formuladas con nanopartículas lipídicas (LNP) cobraron protagonismo como las primeras vacunas contra el virus SARS-CoV-2 aplicadas a nivel mundial. Se han verificado los beneficios, ya conocidos, de las tecnologías basadas en ARNm, que consisten en la ingeniería relativamente simple y rápida del ARNm que codifica para antígenos y proteínas de interés, la ausencia de integración genómica y un proceso de fabricación rápido y eficiente en comparación con otros productos biológicos, sentando así las bases para una amplia gama de aplicaciones. La inmunogenicidad intrínseca del ARNm transcrito in vitro (IVT) formulado con LNP es beneficiosa para las vacunas de LNP-ARNm. Sin embargo, evitar la activación inmunitaria es fundamental para las aplicaciones terapéuticas del LNP-ARNm para el reemplazo de proteínas, donde se requiere la expresión dirigida del ARNm y la administración repetida de altas dosis durante toda la vida. Esta revisión resume nuestro conocimiento actual sobre la activación inmunitaria inducida por el ARNm, los subproductos de la IVT y las LNP. Ofrece una visión general completa del estado actual de los estudios preclínicos y clínicos en los que se utiliza el ARNm de LNP para la reposición de proteínas y el tratamiento de enfermedades raras, con énfasis en la seguridad. Además, la revisión describe innovaciones y estrategias para avanzar en la farmacología y la seguridad del ARNm de LNP para aplicaciones no inmunoterapéuticas. Palabras clave: LNP-ARNm; terapia de reemplazo de proteína ARN; citocinas; eficacia; transcripción in vitro (IVT); inmunidad innata; nanopartículas lipídicas; aplicaciones no inmunoterapéuticas; enfermedad rara; seguridad. Para obtener más información sobre el producto, contáctenos en: EE. UU. Tel: 1-844-782-5734 EE. UU. Tel: 1-844-QUAL-PEG Teléfono de CHN: 400-918-9898 Correo electrónico: sales@sinopeg.com

Revisión de Adv Drug Deliv Rev. 2022 Sep:188:114416. doi: 10.1016/j.addr.2022.114416. Publicación electrónica, 3 de julio de 2022. El papel de los componentes lipídicos en nanopartículas lipídicas para vacunas y terapia génica Abstracto Las nanopartículas lipídicas (NPL) desempeñan un papel importante en las vacunas de ARNm contra la COVID-19. Además, numerosos estudios preclínicos y clínicos, incluyendo el producto de ARNip-NPL, Onpattro®, destacan que las NPL liberan el potencial de las terapias y vacunas basadas en ácidos nucleicos. Para comprender la clave del éxito de las NPL, es necesario comprender la función de los componentes básicos que las constituyen. En esta revisión, analizamos lo que cada componente lipídico aporta a la plataforma de administración de NPL en términos de tamaño, estructura, estabilidad, pKa aparente, eficiencia de encapsulación de ácidos nucleicos, captación celular y escape endosómico. Para explorar esto, presentamos hallazgos en el campo de los liposomas, así como artículos de referencia y recientes en la literatura sobre NPL. También analizamos los desafíos y las estrategias relacionados con los estudios in vitro/in vivo de NPL basados en lecturas de fluorescencia, inmunogenicidad/reactogenicidad y administración de NPL más allá del hígado. La forma en que se aborden estos desafíos fundamentales, incluidos qué componentes lipídicos se agreguen y combinen, probablemente determinará el alcance de las terapias genéticas y las vacunas basadas en LNP para tratar diversas enfermedades. Palabras clave: Administración de fármacos; Lípido colaborador; Lípido ionizable; LNP; Nanopartículas lipídicas; Ácido nucleico; Lípido pegilado; Propiedades fisicoquímicas; Focalización; pK(a). Para obtener más información sobre el producto, contáctenos en: EE. UU. Tel: 1-844-782-5734 EE. UU. Tel: 1-844-QUAL-PEG Teléfono de CHN: 400-918-9898 Correo electrónico: sales@sinopeg.com

Revisión Acc Chem Res. 4 de enero de 2022;55(1):2-12. doi: 10.1021/acs.accounts.1c00544. Publicación electrónica, 1 de diciembre de 2021. Química de nanopartículas lipídicas para la administración de ARN Abstracto Las nanopartículas lipídicas (LNP) son un tipo de vesículas lipídicas que poseen un núcleo lipídico homogéneo. Estas vesículas se utilizan ampliamente en la administración de fármacos y ácidos nucleicos de moléculas pequeñas, y recientemente han ganado mucha atención debido a su notable éxito como plataforma de administración de vacunas de ARNm contra la COVID-19. No obstante, la utilidad de la expresión proteica transitoria inducida por el ARNm se extiende mucho más allá de las vacunas contra enfermedades infecciosas; también son prometedoras como vacunas contra el cáncer, terapias de reemplazo proteico y componentes de edición genética para enfermedades genéticas raras. Sin embargo, el ARNm desnudo es inherentemente inestable y propenso a la rápida degradación por nucleasas y a la autohidrólisis. La encapsulación del ARNm dentro de las LNP protege al ARNm de las ribonucleasas extracelulares y ayuda a la administración intracelular del ARNm. En este artículo, analizamos las características principales de las LNP para la administración de ARN. Centramos nuestra atención en las LNP diseñadas para administrar ARNm; Sin embargo, también incluimos ejemplos de administración de siRNA-LNP cuando corresponde para resaltar las similitudes y las diferencias debido a la estructura del ácido nucleico. Primero, introducimos el concepto de LNP, las ventajas y desventajas de utilizar ácidos nucleicos como agentes terapéuticos y el razonamiento general detrás de la composición molecular de los LNP. También destacamos brevemente los éxitos clínicos más recientes de las terapias de ácidos nucleicos basadas en LNP. Segundo, describimos la teoría y los métodos de autoensamblaje de LNP. La idea común detrás de todos los métodos de preparación es inducir interacciones electrostáticas entre el ácido nucleico y los lípidos cargados y promover el crecimiento de nanopartículas a través de interacciones hidrofóbicas. Tercero, desglosamos la composición de LNP con especial atención a las propiedades fundamentales y los propósitos de cada componente. Esto incluye los criterios de diseño molecular identificados, el abastecimiento comercial, el impacto en el tráfico intracelular y la contribución a las propiedades de los LNP. Uno de los componentes clave de los LNP son los lípidos ionizables, que inician la unión electrostática con las membranas endosómicas y facilitan la liberación citosólica; Sin embargo, no se debe ignorar el papel de otros componentes lipídicos, ya que están asociados con la estabilidad, la depuración y la distribución de las LNP. En cuarto lugar, revisamos los atributos de las construcciones de LNP en su conjunto que pueden influir significativamente en la administración de ARN. Estos atributos son el tamaño de las LNP, la carga, la estructura ...

Review Research (Washington DC). 18 de junio de 2024:7:0370. doi: 10.34133/research.0370. eCollection 2024. Desbloqueo de la aplicabilidad terapéutica del ARNm de LNP: química, formulación y estrategias clínicas Abstracto El ARN mensajero (ARNm) se ha convertido en una modalidad terapéutica innovadora que ofrece prometedoras vías para la prevención y el tratamiento de diversas enfermedades. El enorme éxito de las vacunas de ARNm en la lucha contra la enfermedad por coronavirus 2019 (COVID-19) demuestra el ilimitado potencial médico y terapéutico de la tecnología del ARNm. Los recientes avances en nanopartículas lipídicas (LNP) han permitido superar los retos relacionados con la estabilidad, la inmunogenicidad y la precisión de la diana del ARNm. Esta revisión resume las terapias de vanguardia basadas en LNP-ARNm, incluyendo su estructura, composición de materiales, directrices de diseño y principios de cribado. Además, destacamos las tendencias preclínicas y clínicas actuales en terapias con LNP-ARNm en una amplia gama de tratamientos en afecciones oftalmológicas, inmunoterapia oncológica, edición génica y medicina de enfermedades raras. Se presta especial atención a la traducción y evolución de las vacunas de LNP-ARNm hacia un espectro más amplio de terapias. Exploramos las preocupaciones relacionadas con la eficacia inadecuada de la focalización extrahepática, las dosis elevadas, los problemas de seguridad y los desafíos de los procedimientos de producción a gran escala. Este debate puede ofrecer perspectivas sobre las perspectivas de desarrollo clínico a corto y largo plazo de las terapias con ARNm de LNP. Para obtener más información sobre el producto, contáctenos en: EE. UU. Tel: 1-844-782-5734 EE. UU. Tel: 1-844-QUAL-PEG Teléfono de CHN: 400-918-9898 Correo electrónico: sales@sinopeg.com